Фармакодинамика
Механизм действия
Софосбувир – пангенотипный ингибитор РНК-полимеразы NS5B вируса гепатита С, которая важна для репликации вируса. Софосбувир – нуклеотидная депо-форма, после участия во внутриклеточном обмене веществ формирует фармакологически активный уридинаналоговый трифосфат (GS-461203), который можно ввести в РНК вируса гепатита С полимеразой NS5B, и действует как агент, который обрывает цепь. В биохимическом анализе GS-461203 ингибировал полимеразную активность рекомбинанта NS5B в вирусе гепатита С генотипов 1b, 2a, 3a и 4a со значениями 50% ингибиторной концентрации (IC50) в пределах 0,7-2,6 мкМ. GS-461203 (активный метаболит софосбувира) не является ингибитором ДНК- и РНК-полимераз человека, а также не является ингибитором митохондриальной РНК-полимеразы.
Противовирусное действие
В анализах репликации HCV величины эффективной концентрации (EC50) суфосбувира против полноразмерных репликонов генотипов 1a, 1b, 2a, 3a и 4a составляли 0,04, 0,11, 0,05, 0,05 и 0,04 мкМ соответственно софосбувира против гибридных репликонов 1b, кодирующих NS5B из генотипа 2b, 5a или 6a, составляли от 0,014 до 0,015 мкМ. Средняя ± SD EC50 софосбувира против гибридных репликонов, кодирующих последовательности NS5B из клинических штаммов, составляла 0,068 ± 0,024 мкМ для генотипа 1a (n = 67), 0,11 ± 0,029 м0М для 0,029 м2 18 мкМ для генотипа 2 (n=15) и 0,085±0,034 мкМ для генотипа 3a (n=106). В этих анализах противовирусное действие софосбувира.in vitroпротив менее распространенных генотипов 4, 5 и 6 походила на ту, которая наблюдалась в отношении генотипов 1, 2 и 3.
Наличие 40% сыворотки крови человека не имело влияния на противовирусное действие софосбувира на HCV.
Устойчивость
Клеточная культура.Репликоны HCV с пониженной чувствительностью к софосбувиру были выбраны в культуре клетки для многих генотипов, включая 1b, 2a, 2b, 3a, 4a, 5a и 6a. Сниженная чувствительность к софосбувиру была связана с первичной NS5B заменой S282T во всех генотипах репликонов анализа. Направленный мутагенез замены S282T в репликонах 8 генотипов обеспечил 2-18-кратное снижение чувствительности к софосбувиру и уменьшение вирусной репликации на 89-99% по сравнению с соответствующим диким типом. В биохимических анализах рекомбинант NS5B полимеразы из генотипов 1b, 2a, 3a и 4a, выражающий замену S282T, показал пониженную чувствительность к GS‑461203 по сравнению с соответствующими дикими типами.
Клинические исследования.В объединенном анализе из 991 пациента, принимавших софосбувир в фазе 3 исследования, 226 пациентов прошли отбор для анализа устойчивости по вирусологической неэффективности и раннего прекращения приема препарата, они имели РНК HCV > 1000 МЕ/мл. После начальных последовательностей NS5B были доступны для 225 из 226 пациентов с данными глубокого секвенирования (отсев анализа 1%) от 221 из этих пациентов. Замена S282T, связанная со стойкостью к софосбувиру, не была обнаружена ни у одного из этих пациентов при глубоком секвенировании или секвенировании популяции. Замена S282T в NS5B была обнаружена у одного пациента, получавшего монотерапию софосбувиром в фазе 2 исследования. Этот пациент имел 99%) на четвертой неделе после лечения, что дало 13,5-кратное изменение в EC50 софосбувира и уменьшило возможность вирусной репликации. Замена S282T вернулась к дикому типу за следующие 8 недель и ее больше не было обнаружено глубоким секвенированием на 12 неделе после лечения.
Две замены NS5B (L159F и V321A) были обнаружены в повторных образцах, взятых после лечения, из многих генотипов трех пациентов, инфицированных HCV в фазе 3 клинических исследований. Никакого изменения фенотипной чувствительности к софосбувиру или рибавирину не выявлено у изолированных пациентов с этими заменами. К тому же, замены S282R и L320 были обнаружены при лечении глубоким секвенированием у пациента до пересадки с частичным реагированием на лечение. Клиническая важность этих открытий неизвестна.
Влияние начальных полиморфизмов HCV на результат лечения
Первоначальные последовательности NS5B были получены для 1292 пациентов в фазе 3 исследования посредством секвенирования популяции, и замена S282T не была обнаружена у ни одного пациента с наличием начальной последовательности. При оценке анализа влияния начальных полиморфизмов на результат оценки не было выявлено статистически значимой связи между наличием варианта NS5B HCV в начале и после лечения.
Перекрестная стойкость
Репликоны HCV, выражающие замену S282T, связанную с устойчивостью к софосбувиру, были полностью чувствительны к другим классам противовирусных агентов HCV. Софосбувир сохранял активность против замен NS5B – L159F и L320F, связанных с устойчивостью к другим ингибиторам нуклеозида. Софосбувир был полностью активен против замен, связанных с устойчивостью к другим противовирусным средствам прямого действия с различными механизмами действия, такими как ненуклеозидные ингибиторы NS5B, ингибиторы протеазы NS3 и ингибиторы NS5A.
Фармакокинетика
Софосбувир – нуклеотидная депо-форма, интенсивно участвующая в обмене веществ. Активный метаболит формируется в гепатоцитах и не проявляется в плазме крови. Главный (>90%) метаболит GS-331007 является неактивным. Он формируется секвентными и параллельными путями, ведущими к образованию активного метаболита.
Абсорбция
Фармакокинетические свойства софосбувира и главного циркулирующего метаболита GS-331007 оценивались у здоровых взрослых пациентов и пациентов с хроническим гепатитом C. После перорального приема софосбувир быстро всасывался, а наибольшая концентрация в плазме крови была обнаружена через ~0,5-2 ее уровня. Наибольшая концентрация GS-331007 в плазме крови была обнаружена через 2-4 часа после приема дозы. На основе фармакокинетического анализа популяции у пациентов с генотипами 1-6 инфекции HCV (n = 986), стационарная AUC0-24 для софосбувира и GS-331007 была 1010 нг•ч/мл и 7200 нг•ч/мл соответственно. Что касается здоровых пациентов (n = 284), то софосбувир и GS-331007 AUC0-24 были на 57% выше и на 39% ниже соответственно, чем у пациентов, инфицированных HCV.
Воздействие пищи.Согласно условиям диеты, прием одной дозы софосбувира с обычной, с высоким содержанием жиров пищей замедлил скорость всасывания софосбувира. Объем всасывания софосбувира был увеличен примерно в 1,8 раза с незначительным влиянием на максимальную концентрацию. Действие GS-331007 не изменилось при приеме пищи с высоким содержанием жиров.
Распространение
Софосбувир не является субстратом для транспортеров всасывания лекарственных средств, действующих на печень, полипептидов, транспортирующих органические анионы (OATP) 1B1 или 1B3, и транспортеров органических катионов (OCT) 1. Относительно активной трубчатой секреции, GS-3310 транспортеров, транспортеров органических анионов (OAT) 1 или 3, включительно OCT2, MRP2, P-gp, BCRP или MATE1. Софосбувир и GS-331007 не являются ингибиторами транспортеров лекарственных средств P-gp, BCRP, MRP2, BSEP, OATP1B1, OATP1B3 и OCT1. GS-331007 не является ингибитором OAT1, OCT2 и MATE1.
Софосбувир примерно на 85% связывается с протеинами плазмы человека (данныеex vivo) и эта связь не зависит от концентрации препарата вне диапазона 1-20 мкг/мл. Связь GS-331007 с протеинами плазмы человека была минимальной. После одной дозы 400 мг [14C]-софосбувира у здоровых пациентов отношение радиоактивности14C крови в плазму составляло примерно 0,7.
Биотрансформация
Софосбувир активно метаболизируется в печени с образованием фармакологически активного нуклеозидного аналога, трифосфата GS-461203. К пути метаболической активации относится последовательный гидролиз части эфира карбоновой кислоты, катализируемой человеческим катепсином A (CatA) или карбоксилестеразой 1 (CES1), и отщепление фосфорамидата протеином, связывающим трехвалентный гистидиннуклеотид 1 (HINT1), сопровождающийся . Дефосфорилирование приводит к формированию метаболита нуклеозида GS-331007, который невозможно эффективно рефосфорилировать и не вызывает активности антител к HCV.in vitro. Софосбувир и GS-331007 не являются субстратами или ингибиторами энзима UGT1A1 или CYP3A4, CYP1A2, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19 и CYP2D6.
После одной пероральной дозы 400 мг [14C]-софосбувира, софосбувира и GS-331007, отвечающие приблизительно 4 и > 90% систематического воздействия материалов-производных препарата (сумма AUC софосбувира и его метаболитов, скорректированная на молекулярную массу) соответственно.
Выведение из организма
После 1 пероральной дозы 400 мг [14C]-софосбувира среднее выведение дозы в среднем составляло более 92%, состоявших примерно из 80%, 14% и 2,5%, выводимых с мочой, калом и выдыхаемым воздухом. Большинство дозы софосбувира, которая выводилась с мочой в виде GS-331007 (78%), тогда как 3,5% – в виде софосбувира. Эта информация указывает на то, что очищение почками – основной путь вывода GS-331007 и большая его часть активно выделяется. В среднем период полураспада софосбувира и GS-331007 длился 0,4 и 27 часов соответственно.
Линейность/нелинейность
Линейность дозы софосбувира и его основного метаболита, GS-331007, была оценена у здоровых пациентов, придерживающихся диеты. Значения AUC софосбувира и GS-331007 почти пропорциональны дозам при приеме дозами от 200 до 400 мг.
Возраст, пол и раса
Никаких клинически значимых фармакокинетических различий в соответствии с полом или расой не было обнаружено для софосбувира и GS-331007.
Фармакокинетика софосбувира и GS 331007 у детей не исследовалась.
Популяционный фармакокинетический анализ у пациентов, инфицированных HCV, показал, что в пределах проанализированного возрастного диапазона (19-75 лет) возраст не имел клинического эффекта на влияние софосбувира и GS-331007. В клинических исследованиях приняло участие 65 пациентов в возрасте от 65 лет. Скорость реагирования, наблюдаемая у пациентов старше 65 лет, была такой же, как и у младших пациентов.
Нарушение функции почек
Фармакокинетика софосбувира была исследована у пациентов, не инфицированных HCV, со слабым (рШКФ ≥ 50 и 2), средним (рШКФ ≥ 30 и 2), тяжелым нарушением функции почек (рШКФ 2) и пациентов с хронической почечной недостаточностью, требующей г приема одной дозы 400 мг софосбувира. По сравнению с пациентами с нормальной функцией почек (рККФ > 80 мл/мин/1,73 г2) AUC0-inf софосбувира была на 61%, 107% и 171% больше в случае слабого, среднего и тяжелого нарушения, AUC0-inf GS-331007 была на 55%, 88% и 451% больше соответственно. У пациентов с ХПН по сравнению с пациентами с нормальным функционированием почек AUC0-inf софосбувира была на 28% больше при приеме дозы софосбувира за 1 час до гемодиализа и больше на 60%, когда дозу принимали за 1 час после него. AUC0-inf GS-331007 у пациентов с ХПН невозможно достоверно определить. Хотя данные указывают на влияние GS-331007 как минимум в 10 и 20 раз больше при хронической почечной недостаточности по сравнению со здоровыми пациентами, если софосбувир принимали за 1 час до и за 1 час после гемодиализа соответственно.
Гемодиализ может эффективно вывести (53% коэффициент очистки) главный циркулирующий метаболит GS-331007. Во время 4-часовой процедуры гемодиализа было выведено около 18% принятой дозы. Для пациентов с легким и средним нарушением почек не требуется корректировка дозы. Безопасность софосбувира не была оценена для пациентов с тяжелым нарушением функции почек или ХПН (см. раздел «Особые оговорки»).
Печеночная недостаточность
Фармакокинетику софосбувира изучали после 7-дневного применения 400 мг дозы софосбувира пациентам, инфицированным HCV, со средней и тяжелой печеночной недостаточностью (класс B и C по классификации Чайлда-Пью-Туркота). По сравнению с пациентами с нормальным функционированием печени AUC0-24 софосбувира была на 126% и 143% больше при средней и тяжелой печеночной недостаточности, а AUC0-24 GS-331007 была на 18% и 9% больше соответственно. Популяционный фармакокинетический анализ с участием пациентов, инфицированных HCV, показал, что цирроз не имел клинического эффекта на влияние софосбувира и GS-331007. Для пациентов с легким, средним и тяжелым нарушением функции печени не рекомендуется корректировать дозу (см. «Способ применения и дозы»).
Фармакокинетическая/фармакодинамическая связь
Эффективность в плане быстрой вирусной реакции оказалась связанной с влиянием софосбувира и GS-331007. Однако ни один из этих показателей не был выбран как общий суррогатный маркер эффективности (SVR12) при терапевтической дозе 400 мг.
Данные доклинических исследований безопасности.
В ходе повторных исследований токсичности дозы на крысах и собаках высокие дозы диастереоизомерной (1:1) смеси отрицательно влияли на печень (собака) и сердце (крыса) и вызывали отрицательные желудочно-кишечные реакции (собака). Влияние софосбувира нельзя было выявить в ходе исследований на грызунах, вероятно, из-за высокой активности эстераз, хотя доза основного метаболита GS-331007, которая имела негативное влияние, была в 29 раз (крыса) и 123 раза (собака) больше 400 мг . Никаких нарушений печени или сердца не было выявлено при исследовании хронической токсичности в случае воздействия, в 9 раз (крыса) и 27 раз (собака) больше, чем клиническое влияние.
Софосбровир не был генотоксическим в тестахin vitro илиживой, в т. ч. бактериальную мутагенность, хромосомную аберрацию, с использованием периферических лимфоцитов крови человека и микронуклеарных анализов мышейживой.
Исследования канцерогенности на мышах и крысах не выявили потенциала канцерогенности софосбувира при применении в дозах до 600 мг/кг/сутки для мышей и 750 мг/кг/сутки крыс. Влияние GS-331007 в этих исследованиях было до 30 раз (мыши) и 15 раз (крысы) больше, чем клиническое влияние 400 мг софосбувира.
Софосбувир не влиял на жизнеспособность эмбриона-плода или фертильность крыс и не был тератогенным для крыс и кроликов согласно исследованиям развития. Никаких негативных влияний на поведение, размножение или развитие потомства у крыс не было обнаружено. В ходе исследования кроликов влияние софосбувира было в 9 раз больше, чем ожидаемое клиническое влияние. В ходе исследования крыс не удалось выяснить влияние софосбувира, но влияние на основе главного человеческого метаболита колебалось в пределах от 8 до 28 раз больше, чем клиническое влияние 400 мг софосбувира.
Вещества-производные софосбувира проникали через плаценту беременных крыс и молоко крыс в период лактации.